Род Atopobium был впервые описан группой авторов (Collins &
Wallbanks) 1992 году. Основанием для его выделения в отдельный род послужили результаты секвенирования гена 16S РНК. Atopobium vaginae принадлежит к семейству Corinobacteriaceae и представляет собой грамположительную анаэробную палочку (или по данным некоторых авторов - полиморфные кокки). В дальнейшем, различными иследователями этот микроб обнаруживался в ротовой полости, генитальном тракте, клинических образцах при раневой инфекции, тазовых абсцессах, уроинфекции.
Когда встречается вагинальный атопобиум.
В настоящее время с Atopobium vaginae связывают развитие бактериального вагиноза и воспалительных заболеваний малого таза.Окончательно патогенная роль вагинального атопобиума не установлена.Вагинальный атопобиум со значительной частотой встречается у женщин с бактериальным вагинозом, и в настоящее время считается,что инфекция, вызванная Atopobium vaginae более специфична для бактериального вагиноза, чем инфекция, вызванная Gardnerella vaginalis. Большая частота рецидивов бактериального вагиноза у женщин, у которых обнаружен A .vaginae подтверждает, что его своевременное выявление имеет большое значение в выборе тактики лечения и предотвращения нежелательных последствий.
Почему важно определение атопобиума
Маркер бактериального вагиноза
Вагинальный атопобиум считается высокоспецифичным маркером (специфическим признаком) бактериального вагиноза и его обнаружение свидетельствует о наличии у женщины этого заболевания,что особенно важно для диагностики бессимптомной формы бактериального вагиноза.Если это предположение будет окончательно доказано,то для диагностики бактериального вагиноза будет достаточно определить наличие Atopobium vaginae не прибегая к таким методам диагностики,как критерии Амселя, баллы Нугента,
определение лактобациллярной степени,что удешевит и ускорит диагностику.
Воспалительные заболевания малого таза
Практически доказана роль вагинального атопобиума в развитии рецидивирующих форм бактериального вагиноза и воспалительных заболеваний малого таза.
Целенаправленное лечение позволит предотвратить рецидивы бактериального вагиноза и развитие осложнений
Устойчивость к нитроимидазолам
Особенностью A. vaginae является высокая устойчивость к метронидазолу - традиционному средству для лечения бактериального вагиноза.Обнаружение вагинального атопобиума позволяет избегать неэффективного лечения и вовремя назначить специфическое лечение
Возможная патогенность для мужчин
Изучается патогенность вагинального атопобиума у мужчин, и рассматривается возможность временного или стойкого его носительства мужчинами,что важно в понимании
инфицирования вагинальным атопобиумом половых партнеров. Возможно вагинальный атопобиум играет значимую роль в развитии анаэробных баланопоститов у мужчин.
Как диагностируется вагинальный атопобиум
Atopobium vaginae не имеет специфических микроскопических признаков как G.vaginalis и Mobiluncus spp. и выглядит под микроскопом как обычная коринобактерия, которая довольно часто встречаются у здоровых женщин.Также возникают трудности при его определении с помощью культурального исследования. Поэтому основным методом диагностики вагинального атопобиума является полимеразная цепная реакция.
Наши работы по изучению Atopobium vaginae
Обнаружение методом ПЦР ATOPOBIUMVAGINAEу женщин с синдромом бактериального вагиноза
РостНИПЧИ Роспотребнадзора, г. Ростов-на-Дону Женская консультация № , г. Ростов-на-Дону
Недавно описан микроорганизм - Atopobium vaginae, который, как установлено, включается в патогенез бактериального вагиноза (БВ), осложняя его течение и лечение (Jovita M. et al, 1999; Bradshaw C.S. et al., 2006). Внимание исследователей привлек тот факт, что при наличии этого микроорганизма в ассоциации с другими анаэробными микробами, вызывающими БВ, заболевание значительно хуже поддается лечению метронидазолом. Позже было продемонстрировано, что некоторые штаммы A.vaginae характеризуются высоким уровнем резистентности к этому химиопрепарату (Backer E et al.,2006). В этой связи для выбора наиболее адекватной терапии необходимо проведение грамотной диагностики с выявлением всех возможных ассоциантов, участвующих в формировании синдрома БВ. Однако бактериоскопический метод, достаточно успешно используемый для диагностики БВ, оказался малопригоден для детекции A.vaginae в связи с выраженным полиморфизмом бактерий (от мелких Грам-позитивных кокков до палочек) (Schwiertz A. et al., 2006). Кроме того, этот микроорганизм плохо поддается культивированию на искусственных питательных средах (Jovita M. еt al, 1999; Schwiertz A. et al., 2006). Поэтому, в настоящее время обнаружение A.vaginae базируется на молекулярно-биологических методах исследования – ПЦР-анализе. Вместе с тем, недостаточная изученность этиологической значимости A.vaginae в формировании БВ определяет тот факт, что методы современной диагностики БВ не предусматривает выявление этого микроорганизма.
В этой связи, целью настоящей работы явилось изучение возможности обнаружения A.vaginae с помощью ПЦР-анализа микрофлоры отделяемого влагалища женщин детородного возраста с синдромом БВ, обратившихся за гинекологической помощью в поликлинику № г. Ростова-на-Дону.
Материалы и методы
Исследована микрофлора отделяемого влагалища 48 женщин в возрасте от 16 до 48 лет, обратившихся в гинекологическое отделение с жалобами или клинической картиной БВ, из которых у 32 был установлен БВ.
Микробиологическое исследование включало микроскопию мазков материала заднего свода влагалища с окраской по Граму для оценки качественного состава вагинальной микрофлоры (наличие резидентной микрофлоры, наличие мелких Грам-вариабельных бактерий, формирование ключевых клеток).
ПЦР-анализ проводили с использованием праймеров, предложенных Ferris et al., 2004; термостабильной ДНК-полимеразы (Taq- полимераза,"ДиаЛат", Москва) в темоциклере МС -2 "Терцик" (АО "ДНК-Технология", Москва). Режим амплификации после внесения минерального масла составлял: денатурация - 940 С, 35 сек; отжиг - 600 С, 25 сек; синтез - 720 С, 35 сек (всего - 40 циклов).
Результаты исследования
При исследовании женщин на наличие в вагинальном содержимом ДНК A.vaginae методом ПЦР установлено ее присутствие при достаточно высокой степени выявления (47%). Интересно отметить, что наибольшее число положительных находок (до 70% от количества позитивных по A.vaginae обследованных) приходилось на пациенток со смешанной анаэробной микрофлорой (G. vaginalis как доминирующая культура в ассоциации с Mobiluncus, Fuzobacterium или Bacteroides spp). В то же время при моноинфекции, вызванной G. vaginalis, частота обнаружения составила лишь 30%. Полученные результаты согласуются с данными других авторов о существовании прямой коррелятивной связи G. vaginalis и A.vaginae (Schwiertz A. et al., 2006).
Таким образом, при выраженном анаэробном дисбиозе, помимо известных анаэробных видов бактерий, достаточно часто может присутствовать относительно новый ассоциант - A.vaginae. Вопрос о его этиологической значимости в формировании БВ на сегодняшний день остается открытым и нуждается в накоплении более обширных данных.
Частота выявления Atopobium vaginae и Gardnerella vaginalis методом полимеразной цепной реакции у сексуально-активных женщин Агапов С.А., Водопьянов А.С., Олейников И.П., Водопьянов С.О.
РостНИПЧИ Роспотребнадзора, г. Ростов-на-Дону
Вагинальный атопобиум (Atopobium vaginae) в настоящее время считается одним из возбудителем бактериального вагиноза (7).Было отмечено более редкое обнаружение A.vaginae у женщин с нормальной микрофлорой,чем у женщин с бактериальным вагинозом (3,6) и у девственниц (1).Для детекции A.vaginae предложены ПЦР (2,4) и ПЦР real time (5).Однкао число публикаций и количество проведенных исследований пока невелико,чтобы сделать однозначные выводы о специфичности A.vaginae для диагностики бактериального вагиноза.Нами было проведено исследование целью которого было определить частоту выявления G.vaginalis и A.vaginae у сексуально-активных женщин с нормальной микрофлорой и у женщин с бактериальным вагинозом и возможности использования метода ПЦР как скрининговой реакции для диагностики бактериального вагиноза
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: Определить частоту выявления у сексуально-активных женщин G.vaginalis и A.vaginae у женщин с нормальной микрофлорой и у женщин с бактериальным вагинозом.
МЕТОДЫ: Методом ПЦР исследовались вагинальные образцы,взятые от 136 женщин в возрасте от 17 до 45 лет,имеющих 2 и более половых партнеров в год.A.vaginae выявлен в 43 случаях (31.6 %),G.vaginalis в 89 (65,4 %) от общего числа исследуемых образцов.Бактериальный вагиноз был выявлен у 48 (35.2%) женщин.Наличие бактериального вагиноза оценивали по наличию 3 и более критериев Амселя.Частота вывления A.vaginae и G.vaginalis у женщин с бактериальным вагинозом составила соответственно 36 (75 %) и 48 (100%),а у женщин без бактериального вагиноза (n=88) A.vaginae выявлен в 7 (7,9%) случаев,а G.vaginalis в 41 (46,5 %) случаев.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Таким образом, Atopobium vaginae значительно чаще встречается у женщин с бактериальным вагинозом,чем у женщин с нормальной микрофлорой,что позволяет использовать его обнаружение с помощью ПЦР для скрининговой диагностики бактериального вагиноза.
Применение полимеразной цепной реакции для выявления колонизации A.vaginae уретры мужчин,половых партнеров женщин с бактериальным вагинозом. Агапов С.А., Водопьянов А.С., Водопьянов С.О., Олейников И.П.
РостНИПЧИ Роспотребнадзора, г. Ростов-на-Дону
Вагинальный атопобиум (Atopobium vaginae) в настоящее время считается одним из возбудителем бактериального вагиноза (7).A.vaginae обнаруживается у женщин с нормальной микрофлорой и бактериальным вагинозом (3,6),у девственниц (1) и у женщин постменструального периода (3).Для детекции A.vaginae предложены ПЦР (2,4) и ПЦР real time (5).Однако нам не встречались публикации о выявлении A.vaginae у мужчин и о возможной сексуальной трансмиссии микроорганизма.Нами было проведено исследование, целью которого было определить частоту выявления A.vaginae у мужчин - половых партнеров женщин с бактериальным вагинозом,у которых был выявлен вагинальный атопобиум.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: Определить частоту выявления Atopobium vaginae в уретре у мужчин - половых партнеров женщин с бактериальном вагинозом
МЕТОДЫ: Методом ПЦР исследовались уретральные образцы,взятые от 32 мужчин в возрасте от 22 до 47 лет,половых партнеров женщин с бактериальным вагинозом с выявленным A.vaginae.А.vaginae был выявлен в 15 (46.8%) случаев.При клиническом обследовании у 6 мужчин был выявлен баланопостит,другой патологии не было обнаружено.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ: A.vaginae колонизирует уретру мужчин,половых партнеров женщин с бактериальным вагинозом,что может свидетельствовать о сексуальной передаче микроорганизма.Наличие баланопоститов у мужчин может быть связано с инфицированием A.vaginae,хотя возможно в их формировании участвуют другие анаэробные бактерии - возбудители бактериального вагиноза (G.vaginalis,Mobiluncus sp.,Leptotrichia) что требует дальнейшего изучения.
Юридические основы выявления Atopobium vaginae
Выявление Atopobium vaginae регламентированно Приказом МЗ РФ N 64 от 21 февраля 2000 г.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПРИКАЗ
21 февраля 2000 г.
N 64
ОБ УТВЕРЖДЕНИИ НОМЕНКЛАТУРЫ КЛИНИЧЕСКИХ
ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
УТВЕРЖДЕНО
Приказ Министерства здравоохранения
Российской Федерации
от 21.02.2000 г. N 64
НОМЕНКЛАТУРА
КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,
ПРИМЕНЯЕМЫХ В ЦЕЛЯХ ДИАГНОСТИКИ БОЛЕЗНЕЙ И СЛЕЖЕНИЯ
ЗА СОСТОЯНИЕМ ПАЦИЕНТОВ В УЧРЕЖДЕНИЯХ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
9. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
9.1. Бактериология
9.1.2.1.3. Условно-патогенные облигатные анаэробные микроорганизмы-возбудители гнойно-септических и оппортунистических заболеваний в биоматериалах:
Пунктаты из абсцессов, закрытых
полостей, биоптаты тканей, крови,
плевральной жидкости, других материалов
Acidaminococcus род
A. fermentans
Atopobium род
A. parvulum
Bacteroides род
B. fragilis
В. thetaiotaomicron
B. vulgatus
Bifidobacterium род
В плане практической значимости, на наш взгляд, интересными являются следущие работы зарубежных исследователей:
Связь Atopobium vaginae и Gardnerella vaginalis с бактериальным вагинозом и его рецидивом после пероральной терапии метронидазолом
Bradshaw CS, Tabrizi SN, Fairley CK, Morton AN, Rudland E, Garland SM.
J Infect Dis. 2006 Sep 15;194(6):828-36. Epub 2006 Aug 16
Мы изучили связь между Atopobium vaginae и бактериальным вагинозом и роль, которую A. vaginae играет в рецидиве бак вагиноза после терапии метронидазолом.
МЕТОДЫ. В исследование были включены 358 женщин, имеющих вагинальный диском-форт или неприятный запах. Определение Atopobium vaginae and Gardnerella vaginalis проводи-лось методом ПЦР. Женщины с бактериальным вагинозом (всего 139 и имеющих более 3 диаг-ностических критериев бак вагиноза) были пролечены метронидазолом (по 400 мг дважды в день в течении 7 дней). Контрольное обследование проводилось через 1, 3, 6 и 12 месяцев или по рецидиву инфекции Atopobium vaginae или Gardnerella vaginalis.
РЕЗУЛЬТАТЫ. Atopobium vaginae и Gardnerella vaginalis были высоко специфичны для бак вагиноза в 96% (доверительный интервал р<0.03) и в 99% (при доверительном интервале p<0.05). Однако Atopobium vaginae (обнаружен в 77%) оказался более специфичен для бактери-ального вагиноза чем Gardnerella vaginalis (обнаружена в 35%). Atopobium vaginae более редко встречался без Gardnerella vaginalis, а женщины, имеющие двух микроорганизмов, имели гораз-до больше рецидивов бактериального вагиноза (83%), чем женщины, имеющие только Gard-nerella vaginalis (38%).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Инфекция, вызванная Atopobium vaginae более специфична для бактери-ального вагиноза чем инфекция, вызванная Gardnerella vaginalis. Большая частота рецидивов бактериального вагиноза у женщин, имеющих A vaginae и G vaginalis подтверждает, что Atopo-bium vaginae вносит больший вклад в развитие бактериального вагиноза. Однако его этиологическая роль остается пока неясной.
Перевод: Водопьянов А.С. 2007 год
alexvod@diagnostica.su
Антибиотикочувствительность Atopobium vaginae
De Backer E, Verhelst R, Verstraelen H, Claeys G, Verschraegen G, Temmerman M, Vaneechoutte M.
Предыдущие исследования установили что недавно описанная анаэробная бактерия, Atopobium vaginae связанна с бактериальным вагинозом. Мы установили, что штаммы этого труднокуль-тивируемого микроорганизма высоко резистентны к метронидазолу, но чувствительны к клин-дамицину.
МЕТОДЫ. В работе были использованы девять штаммов Atopobium vaginae, четыре штамма Gardnerella vaginalis, два штамма Lactobacillus iners и по одному штамму Bifidobacterium breve, B. longum, L. crispatus, L. gasseri и L. Jensenii.
РЕЗУЛЬТАТЫ. Все девять штаммов Atopobium vaginae были высоко резистентны к налидиксовой кислоте и колистину (колистин – это полимиксин Е - прим. Водопьянов А.С.), тогда как рост штаммов ингибировался даже низкими концентрациями клин-дамицина, рифампицина, азитромицина, пенициллина, ампициллина, ципрофлоксоцина, лине-золида (в России линезолид известен под названием ЗИВОКС - прим. Водопьянов А.С.). Мы установили, что устойчивость к метронидазолу варьирует от 2 до 256 мкг/мл. Четыре штамма G vaginalis были также чувствительны к клиндамицину, три из которых были чувствительны и к метронидазолу в концентрации 1 мкг/мл. Все штаммы лактобактерий были устойчивы к метро-нидазолу, но чувствительны к клиндамицину.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Клиндамицин более высокоактивен против Gardnerella vaginalis и Atopobium vaginae чем метронидазол, но не все штаммы A vaginae устойчивы к метронидазолу, хотя такой вывод делался в предыдущих работах, проведенных с использованием меньшего числа штам-мов.
