Количественное определение возбудителей методом ПЦР
"ПЦР в реальном времени" (Real-Time PCR) позволяет позволяет осуществлять количественную оценку содержания ДНК в исследуемом материале. Метод позволяет определять количество любых микроорганизмов, но наиболее актуален для Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis – микроорганизмов, которые могут присутствовать в небольших количествах у здоровых людей. Лечение необходимо, если их число превышает допустимую норму.
Точное определение количества микробов позволяет избежать неверной постановки диагноза и излишнего лечения |
Принцип метода ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR) основан на детекции продуктов амплификации уже в процессе реакции и проведении мониторинга кинетики накопления ампликонов. Это означает, что учет результата ПЦР (числа ампликонов) происходит после каждого цикла амплификации, а не в конце, как при обычной ПЦР. Чем больше в исходной пробе было специфической ДНК, тем раньше и больше увеличится число специфических фрагментов. Данный способ детекции является альтернативой электрофоретическому методу и имеет ряд существенных преимуществ:
1. Высокая специфичность детекции обусловленная применением гибридизационной схемы с использованием высокоспецифичных олигонуклеотидных зондов;
2. Исключение вероятности контаминации. Возможность проведения реакции амплификации и детекции в одном приборе, что исключает риск контаминации ампликонами и значительно сокращает риск ошибки оператора.
3. Возможность количественной оценки исходной ДНК матрицы
4. Возможность анализа точечных мутаций;
5. Регистрация и учет данных в электронном формате.